用于動力觀察,菌種保存,H 抗原位相變異試驗成分(g/L) ：蛋白胨       10.0牛肉浸粉     3.0瓊脂            4.0氯化鈉        5.0pH值7.4 ± 0.1    25℃用法：稱取本品  22.0g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,煮沸溶解,分裝小試管,121℃高壓滅菌 15 分鍾,直立凝固,備用。

産品描述

人α-乳白蛋白ELISA試劑盒 概述:ELISA（酶聯免疫吸附檢測）是一種平闆檢測技術，旨在檢測和定量肽、蛋白質、抗體和激素等物質。其他名稱，比如酶 免疫測定（EIA）也用于描述該的技術。在 ELISA 中，抗原必須固定化到固體表面，然後與連接到酶的抗體混合。通過 與适當的底物孵育，測量報告基因酶的活性來産生可測量的産物，從而實現檢測。該檢測策略中的＊關鍵元素是高度特 異性的抗體-抗原相互作用。 ELISA試劑盒的特點有：一、高效、靈敏、特異的抗體二、節省實驗經費三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體四、适用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種标本類型五、穩定的重複性和可靠性 ELISA 試劑盒主要保證規格概述規格 描述這些對您的好處是？标準品校準校準符合國家生物标準和控制研究所 (NIBSC) 标準 (如可用)可在多個平台上實現準确定量和一緻的參考标準精度闆間 CV <10%<10% 的平均闆内 CV獲得一緻的結果稀釋線性度檢測範圍内的線性結果可準确定量連續稀釋樣品平行性重組蛋白标準品模拟天然蛋白可靠地檢測樣品回收率緩沖液經過優化，可＊大限度減少基質效應有助于确保對血清和血漿等複雜基質内的樣品進行準确定量分析靈敏度針對特定檢測類型檢測相關水平的蛋白實現低水平蛋白檢測特異性使用類似分析物進行交叉反應性測試幫助确保準确測量目标蛋白質批次間一緻性對内部控制進行測試，以評估數據是否在設定範圍内有助于确保新批次獲得一緻的結果 檢測内精度檢測内驗證顯示檢測闆内孔間的重現性。檢測内驗證産生的數據有助于确保在闆的不同孔中檢測的樣品給出可比較結果。以下是爲具有代表性的闆内驗證實驗生成和報告的數據示例。在本示例中， 通過在同一檢測中檢測三個樣品各重複 14 次來評估 Invitrogen VCAM-1 人 ELISA 試劑盒。每個樣品的 %CV 表明該檢測具有良好的重現性。具有已知 Hu sVCAM-1 濃度的樣品重複檢測14 次，以确定檢測的精度。參數樣品 1樣品 2樣品 3平均值（ng/mL）1.234.3318.59标準差0.060.331.43變異系數 (%CV)4.857.627.68檢測間精度檢測間精度顯示不同日期進行的檢測間重現性。檢測間精度通常爲< 10%。這确保獲得的結果随着時間的推移和試劑盒之間保持一緻。以下是爲檢測間精度生成和報告的典型數據示例。在該示例中， 使用 Invitrogen 澱粉樣蛋白 β 42 人 ELISA 試劑盒在多天内檢測三份樣品，共檢測 36 次。結果顯示變異系數小于 10%，從而證明了檢測間良好再現性。參數樣品 1樣品 2樣品 3平均值（ng/mL）71.3040.1621.29标準差5.243.961.13Coefficient of Variation (% CV)7.369.855.32稀釋線性度線性是相對于基于标準曲線的分析物計算量來定義。樣品中分析物的＊終計算濃度應與檢測定量範圍内的任何稀釋濃度相同。開發完善的免疫檢測試劑盒可＊大限度地減少不同樣品基質和其他可能幹擾的因素的潛在影響。稀釋線性驗證實驗提供了關于在不同稀釋水平下測試的樣品結果精度的信息。對每種經驗證樣品類型進行稀釋線性測試，如果結果是每種稀釋預期濃度的 70%-130%，則視爲良好。線性對于在測定的動态範圍内準确測量分析物濃度非常重要，可使用公式計算：% 線性度 = (稀釋後測量濃度 / 預期濃度) x 100特定樣品類型的稀釋線性度通常如下表所示。在該示例中， 使用 HeLa 細胞裂解物評價 Invitrogen c-Myc (總) 人 ELISA 試劑盒。在檢測的動态範圍内，用試劑盒随附的标準稀釋緩沖液稀釋 HeLa 細胞裂解物。測量值與預期值顯示出良好的檢測線性，并且沒有來自樣品基質的明顯幹擾。HeLa 細胞在 37°C 下，含有 10% 胎牛血清 (FBS) 的 DMEM 中生長，并用 細胞提取緩沖液裂解，并進行超聲處理。将該裂解物在标準稀釋緩沖液中稀釋至檢測範圍，并測量 c-Myc（總量）。檢測結果與預期濃度的線性回歸檢測産生的相關系數爲0.99。細胞裂解物稀釋測量值（pg/mL）預期值（pg/mL）% 線性1/10372.3372.31001/20205.7186.141111/40117.293.11261/8056.046.541201/16025.823.31111/3208.811.676ELISA 平行性平行性提供了在給定 ELISA 中以相同方式檢測天然和重組樣品的确認。平行性驗證産生的數據确保給定分析物在天然樣品中以類似于标準曲線的劑量依賴性方式被識别。 ELISA 回收率回收率用于确定分析物檢測是否受樣品基質差異的影響。基質（如血清和血漿）可能具有幹擾因素，影響 ELISA 準确定量分析物的能力。通過将已知量的分析物加标到不同樣品基質中來驗證回收率。進行檢測并确定回收率。通常，如果平均回收率爲 80%-120%，則認爲樣品基質對檢測準确定量分析物的能力影響＊小。 右表是用于報告回收率的典型格式。在該示例中，   檢測了 Invitrogen 脂聯素人 ELISA 試劑盒在 5 份不同血漿樣品中的回收率。 樣品編号平均回收率 (%)199.6299.83100.2492.5591.8 ELISA 靈敏度靈敏度定義爲可與背景區分的＊低分析物水平。這通常稱爲分析靈敏度或檢測限。通過将零标準重複獲得的平均 O.D. 加上 2 個标準偏差來确定靈敏度。例如， Invitrogen Tau (磷酸化) [pT181] 人 ELISA KI 靈敏度 <爲 10 pg/mL。這表明測試的每個試劑盒批次的靈敏度均低于 10pg/mL。用于報告 ELISA 測定靈敏度的典型規格是 " 人 Tau [pT181] <的＊低檢測濃度爲 10 pg/mL。這通過零标準檢測 64 次時獲得的平均 O.D. 加上兩個标準偏差來确定。ELISA 特異性進行特異性測試以驗證檢測到的目标分析物與其他密切相關的分子未發生交叉反應。交叉反應可能導緻假陽性結果或不準确定量。爲了确保僅識别所需的分析物，對一組其他物質進行交叉反應性測試。例如， 通過篩選 20 種不同物質的交叉反應性，對 Invitrogen IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒的特異性進行了檢測。用于報告 ELISA 特異性結果的典型格式是 " 使用 IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒檢測了一組 10 ， 000 pg/mL 的物質的緩沖溶液。 1β γ 檢測後發現無交叉反應性：小鼠 IL-1 β ， IL-2 ， IL-4 ， IL-10 ， IFN- β ， TNF- α ；大鼠 1β IL-1 β ， IL-2 ， IL-4 ， IL-6 ， IFN- γ ， TNF- α ；人 IL-2 ， IL-4 ， IL-6 ， IL-10 ， IL-12 ， IFN- γ ， TNF- α ；豬 IL-8ELISA 質量控制ELISA 的生産過程涉及高質量生産标準，以确保高質量 ELISA 試劑盒的一緻生産。基本因素包括—嚴格的文檔和記錄保存，人員培訓，質量控制程序，設施和設備維護，關鍵流程的驗證，原材料控制，可追溯性，環境監測，變更控制， 和符合監管标準。   ELISA 移液和洗滌技術技巧移液技巧1. 使用符合制造商建議範圍内的正确移液器2. 确認吸頭已牢固地插與移液器上3. 确認移液時沒有氣泡4. 在每個标準品，樣品或試劑之間更換吸頭5. 每種試劑使用不同的儲液槽6. 将樣品吸取到孔的側面，避免飛濺7. 始終進行樣品 / 标準品複孔設置洗滌流程1. 通過将吸頭輕輕地降低到每個孔底部，完全吸液所有孔中的液體。    備注：小心操作，不要劃傷孔内側。2. 用至少 400 μ L ?L 的洗滌緩沖液填充孔3. 浸泡 15 到 30 秒4. 從孔中吸出洗滌緩沖液5. 按照提示重複方案 (通常 3-4 次)6. 清洗完成後，翻轉孔闆并在吸水組織上輕敲 (必要時用力) 幹燥。确保清除所有殘留的液體。7. 或者，也可使用洗瓶或自動洗闆機。請務必 遵循上述内容。 實驗步驟1. 使用前将所有的試劑和标本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。2. 标準品(凍幹品)：每瓶标準品加入标準品稀釋液1mL，蓋好後室溫靜置大約10分鍾，同時反複颠倒/搓動以助溶解，其濃度爲2000pg/mL。準備7個稀釋标準品的EP管，每個EP管中加入150μL的标準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 标準品稀釋液(0pg/mL)直接作爲空白孔。爲保證實驗結果，每次實驗請使用新的标準品溶液。3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水将20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。 注意事項劑盒的儲存1. 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶标簽上所示保存。請注意，收到試劑盒後請盡快将TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。2. 使用後的試劑盒：剩餘試劑仍需按照試劑瓶标簽所示的溫度保存，開封後的酶标闆要加幹燥劑後密封保存于-20℃，避免潮濕。 須知：試劑盒内酶标條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用後的剩餘試劑盒建議在驗後1個月内使用完畢。産品過期時間以盒子上的标簽爲準，保質期内所有組分都确保是穩定的。 DUMABIO ELISA檢測試劑盒公司與各大高校、醫院及權威科研單位保持着良好的合作關系，公司的産品質量及服務态度得到了他們的一緻認可。笃瑪生物本着客戶至上的原則爲客戶提供優質産品，公司産品有任何質量的問題免費包退換（非人爲因素造成的）。公司提供免費代測服務，并且收到樣本七個工作日出結果，确保數據的準确性

産品描述

Size:50ul  100ulConcentration:1mg/mlApplications:WB=1:500-2000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,ICC/IF=1:100-500,IF=1:100-500,ELISA=1:5000-10000Cross Reactive Species:Human,Mouse (predicted: Rat,Rabbit,Pig,Cow,Dog)For research use only. Not intended for diagnostic or therapeutic use.Host:RabbitTarget Protein:SEMA4AIR:Immunogen Range:361-460/761Clonality:PolyclonalIsotype:IgGEntrez Gene:64218Swiss Prot:Q9H3S1Source:KLH conjugated synthetic peptide derived from human SEMA4A:361-460/761 Purification:affinity purified by Protein AStorage:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol. Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.Background:SEMA4A belongs to the semaphorin family of soluble and transmembrane proteins. These proteins play a role in guidance of axonal migration during neuronal development and in

人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA檢測試劑盒  ELISA試劑盒技術流程  雙抗體夾心法(檢測未知抗原)間接法(檢測未知抗體)1、用緩沖液将抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔内溶液，用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然後洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。3、加酶标抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶标抗體(經滴定後的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔内顔色越深，陽性程度越強，陰性反應爲無色或極淺，依據所呈顔色的深淺，以“+”、“-”号表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即爲陽性。1、用包被緩沖液将已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)3、加酶标抗體：于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶标第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鍾，洗滌,＊後一遍用DDW洗滌。4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔内顔色越深，陽性程度越強，陰性反應爲無色或極淺，依據所呈顔色的深淺，以“+”、“-”号表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即爲陽性。 ELISA試劑盒需自備的設備及試劑    1. 450±10nm濾光片的酶标儀(建議儀器使用前提前預熱)2. 單道或多道微量加液器及吸頭3. 稀釋樣品的EP管4. 蒸餾水或去離子水5. 吸水紙6. 盛放洗液的容器 性能:1．準确性：标準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2．靈敏度：檢測濃度小于10 pg/ml。3．特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4．重複性：闆内、闆間變異系數均小于15%。ELISA試劑盒優點：1、高效、靈敏、特異的抗體；2、重複性和可靠性高；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；4、适用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種标本類型；5、可檢測指标齊全：細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、内分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤标志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優生優育檢測等等；6、價格優惠，質量保證，限度的節省實驗經費。 實驗步驟1. 使用前将所有的試劑和标本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。2. 标準品(凍幹品)：每瓶标準品加入标準品稀釋液1mL，蓋好後室溫靜置大約10分鍾，同時反複颠倒/搓動以助溶解，其濃度爲2000pg/mL。準備7個稀釋标準品的EP管，每個EP管中加入150μL的标準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 标準品稀釋液(0pg/mL)直接作爲空白孔。爲保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的标準品溶液。3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水将20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。 注意事項劑盒的儲存及有效期1. 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶标簽上所示保存。請注意，收到試劑盒後請盡快将TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。2. 使用後的試劑盒：剩餘試劑仍需按照試劑瓶标簽所示的溫度保存，開封後的酶标闆要加幹燥劑後密封保存于-20℃，避免潮濕。 須知：試劑盒内酶标條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用後的剩餘試劑盒建議在首次實驗後1個月内使用完畢。産品過期時間以盒子上的标簽爲準，保質期内所有組分都确保是穩定的。 ELISA試劑盒報1、ELISA标準曲線；2、詳細的實驗步驟；3、完整的實驗報告（試劑耗材，實驗方法，實驗結果及結果說明）； [樣本處理及要求]1.  血清：将收集于血清分離管的全血标本在室溫放置2小時或4℃過夜，然後1000×g離心20 分鍾，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。2.  血漿：用EDTA或肝素作爲抗凝劑采集标本，并将标本在采集後的30分鍾内于2-8℃ 1000×g離心15分鍾，取上清即可檢測，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重後将組織剪碎。将剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要适當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。爲了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反複凍融。＊後将勻漿液于5000×g離心5~10分鍾，取上清檢測。4.  細胞培養物上清或其它生物标本：請1000×g離心20分鍾，取上清即可檢測，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。注：标本溶血會影響＊後檢測結果，因此溶血标本不宜進行此項檢測。 [需要而未提供的試劑和器材]1.酶标儀（450nm）2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱4.蒸餾水或去離子水 ELISA檢測試劑盒承諾公司長期與各大高校、醫院及權威科研單位保持着良好的合作關系，公司的産品質量及服務态度得到了他們的一緻認可。笃瑪生物本着客戶至上的原則爲客戶提供優質産品，公司承諾産品有任何質量的問題免費包退換（非人爲因素造成的）。公司提供免費代測服務，并且承諾收到樣本七個工作日出結果，确保數據的準确性

Overview Cat. No： DM-11A04-G Format： LiquidHost： Homo Class： MonoclonalType： Antibody Specificity： Binding to RSV F protein Concentration： Please check the label on the tube. Purity ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification： Protein A Storage buffer： PBS or Tris-Gly Storage conditions： Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles. Warning  Not for therapeutic use.

Overview Cat. No:DM-A11A04-M Format Liquid Host Homo Class Monoclonal Type Antibody Specificity Binding to RSV F protein Concentration Please check the label on the tube. Purity ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification / Storage buffer PBS or Tris-Gly Storage conditions Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles. Warning  Not for therapeutic use.

OverviewCat. No:DM-11A04-G Format: Liquid Host: HomoClass: MonoclonalType: AntibodySpecificity: Binding to RSV F proteinConcentration: Please check the label on the tube. Purity: ≥95% as determined by SDS-PAGE Purification Protein A Storage buffer: PBS or Tris-Gly Storage conditions: Store at 4°C short term. For long term storage, store at -20°C, avoiding freeze/thaw cycles.Warning  Not for therapeutic use.

快速高爾基染色試劑盒(神經元和膠質細胞)産品貨号:  DM1158 産品規格:  6 × 125ml/6 ×250ml産品簡介:Golgi-Cox浸染法是研究神經元和膠質細胞正常和非正常形态＊有效的方法之一。 使用Golgi技術，在藥物處 理過的動物腦中和因神經疾病死亡的病人腦中發現了神經樹突和樹突微小的形态改變 。然而Golgi染色法的不可 靠性且費時已成爲這種方法廣泛應用的障礙。快速高爾基染色試劑盒（神經元和膠質細胞） 是根據Ramón-Moliner ，Glaser和Van der Loos所闡述的方法原 理設計的 。該試劑盒不僅極大地改進并簡化了Golgi-Cox技術，而且被證實在顯示神經元和膠質細胞，尤其是樹 突棘的形态細節極爲靈敏可靠。 生物生産的快速高爾基染色試劑盒已被廣泛用于數種動物腦組織染色。 産品組成: 産品名稱6 × 125ml6×250ml溶液A125ml250ml溶液B125ml250ml溶液C125ml×2250ml×2溶液D125ml250ml溶液E125ml250ml注：溶液C啓封後請盡快用完。 需要但未包括在試劑盒裏的物品1.      雙蒸水或Milli-Q水2.      塑料/玻璃管或瓶 、琉璃樣品回收器、天然毛畫筆、滴瓶、塑料鑷子3.      組織學耗材：明膠包被的顯微鏡載玻片蓋玻片、染色罐乙醇二甲苯樹膠封片劑光學顯微鏡 組織制備使用此試劑盒前必須仔細閱讀以下說明！！l 所用容器（＊好爲塑料材質） 必須用蒸餾水沖洗幹淨。l 當溶液A和溶液B存在時不能使用金屬器具。l 保持容器密封。l 用溶液A和溶液B處理的組織和切片，應該避光。l 除非特别指出， 以下流程需在室溫下完成。  快速高爾基染色試劑盒(神經元和膠質細胞) 1.      殺死動物之前對實驗動物進行深度麻醉。應盡快地從顱骨中取出動物的腦（或死去病人的腦），但操作時必 須非常小心以免損傷或壓迫組織。注意l 除非完全必要，不要對動物進行灌注。如果确實需要對動物進行灌注（用4%的多聚甲醛處理不要超過5分鍾）， 一定不要對組織進行後固定處理。l 體積較大的腦部樣本包括大鼠腦部應該用鋒利的刀片切成大約10mm厚的塊狀。重要提示！2.      用雙蒸水或Milli-Q水快速沖掉組織表面的血液。3.      把組織浸泡在由溶液A和B等體積混合的浸漬液中，室溫下黑暗保存兩周* 。浸泡6個小時以後或次日更換新 的浸漬液。*對于大多數情況浸泡2周是足夠的。然而，不同的組織類型及組織的大小不同可能需要延長或縮短浸泡時間來達 到＊佳效果。對于每種類型的組織的浸泡時間應該通過試驗獲得，但是對于大多數組織浸泡3周是足夠的。注意， 延長浸泡時間可能增加染色背景。注意l 溶液A和溶液B的混合液至少在用之前24小時配制，并不能攪拌。l 采用以上方案則不會産生沉澱是關鍵的。l 制備好的浸泡液在用之前室溫黑暗保存可長達一個月。l 每cm3 待研究組織至少用5ml浸泡液。注意用較少的浸泡液可能降低染色的靈敏性和可靠性。l 爲取得＊佳結果，在浸泡期間每周兩次對裝有組織的容器可輕輕地左右旋渦（一定不要晃動！ ）幾秒鍾。Warning溶液A和B（含有升汞，重鉻酸鉀和鉻酸鉀） 接觸皮膚是有毒的，如果吞咽可能是緻命的。實驗應該在化學通風 櫥中完成。當操作這些試劑時應穿戴防護服，手套和防護面具/眼鏡。不要把溶液A和B的廢棄物倒進水槽中！把溶液A和B的廢棄物收集起來放到一個瓶子中，緻電安全辦公室或有執照的專業廢物處理服務的部門處理些材 料。4.      轉移組織到溶液C中室溫黑暗至少72小時（可長達1周） 。24小時後或次日至少更換一次溶液。5.      在-20℃到-22℃的條件下用冷凍切片機将組織切成100-200um厚的薄片，也可用其它型号的顯微鏡薄片切片 機包括滑動切片機和振動切片機 。用樣本回收器把樣本轉移到含有溶液C的明膠包被的顯微鏡載玻片上。載 玻片上多餘的溶液用吸管吸走并用濾紙吸幹（載玻片上的溶液必須盡可能地吸幹否則切片将從載玻片上脫落 下來） 。切片可以室溫下自然風幹（不能用電風扇或電熱闆使其幹燥） 。爲取得＊佳結果，應盡快地完成切 片，制備好的切片如果保存于載玻片盒中，室溫黑暗條件下＊長可保存3天。注意l 爲避免組織受冷凍切片機的損害，并盡可能地保持細胞形态學，組織在進行冷凍切片之前應快速冰凍。 比如， 組織應按以下描述盡可能地快速冰凍：把組織放在一個塑料匙中慢慢地浸入含有幹冰的異戊烷中預冷（爲取 得＊佳結果，溫度應保持在-70℃以下并且浸入過程用時1分鍾，越慢越好） 。組織完全浸入異戊烷之後，使 組織在異戊烷中浸幾秒鍾，然後再放置幹冰上1分鍾以确保組織能很好地冰凍。進行切片之前不要讓組織融 化。l 切片機的型号可能會有不同，但所用的型号确保能切厚的切片（比如100um）。l 如果冰凍切片機隻有一個溫度設置，那麽在進行切片之前把溫度設置在-22℃至少4個小時。如果有兩個溫度 設置，那麽設置槽内溫度比樣本溫度低1℃ 。請注意大多數情況下-22℃是＊佳的溫度，然而，爲了更順利地 切出切片并沒有破碎，不同型号的切片機和不同的組織可能需要更高或更低的槽内溫度。l 對于用冰凍切片機切片， 以下幾點提示是有益的： 1 ）用蒸餾水把組織固定于樣本盤上，但必須确保組織沒 有融化（可以在幹冰上完成） 。組織可以被固定在任何類型的組織冰凍介質上包括OCT ，但要避免切斷介質。 不要在OCT中包埋組織，如果組織确實需要包埋，用TFM替代OCT 。2） 組織固定到樣本盤後，放置組織于   快速高爾基染色試劑盒(神經元和膠質細胞) 幹冰上10分鍾，然後立即把固定有樣本的樣本盤安裝到冰凍切片機上，等5分鍾之後進行切片。3）切好的一 些切片（不要使用防卷闆） ，如果組織溫度過低比如切片顯示出與刀片平行的裂縫，先等幾分鍾再進行下一 個切片，否則可繼續切。l 浸泡的腦組織可用瓊脂糖或明膠包埋然後用冰凍切片機切片。然後收集切片時（充滿切片槽） ，必須使用溶 液C 。否則切片易幹燥裂紋。l 如果用滑動切片機切浸泡的組織，樣本盤和刀片都需維持在較低的溫度（0℃以下） 按照操作手冊的描述切 片固定在含有溶液C的載玻片上是重要的。VI.  染色步驟在染色過程中和蓋蓋玻片之前的任何一步都不要讓切片變幹1.      用雙蒸水或Milli-Q水沖洗切片兩次，每次4分鍾。2.      把切片置于由1份溶液D ， 1份溶液E和2份的雙蒸水或Milli-Q水組成的混合液中10分鍾。 比如：溶液D          10ml                                    溶液E        10ml                          雙蒸水       20ml注意l 工作液＊好現配現用，每100ml工作液＊多用于100張切片（比如小鼠腦） ， 根據切片的大小。l 盛有工作液的瓶子或染色罐必須蓋好蓋子防止試劑蒸發。l 爲取得＊佳結果，孵育期間應頻繁攪拌工作液。3.      用蒸餾水或Milli-Q水沖洗切片兩次，每次4分鍾（蒸餾水應頻繁更換新的）。4.      用結晶紫或硫堇對切片進行複染（可選步驟）。注意l 對于複染，延長步驟3的時間， 比如用沖洗4次每次5分鍾代替原來的沖洗2次每次4分鍾，或者更長的時間。5.     在50% ，75%和95%的乙醇中對切片進行脫水，每個濃度梯度脫水4分鍾（不要跳過任何一個步驟）。6.      然後在無水乙醇中對切片進行脫水，4次，每次4分鍾（不要延長時間）。7.      在二甲苯中透明，3次，每次4分鍾，并且用樹脂封片劑對蓋玻片進行封片。注意l 蓋玻片之前切片可以暫時存于二甲苯中幾個小時。l 爲取得＊佳結果，＊好用未稀釋的封片劑。l 用Golgi染色的切片無論何時都應避光保存。 注意事項1.      快速高爾基染色試劑盒（神經元和膠質細胞）僅用于體外研究，不能用于診斷或其它應用。2.     試劑盒所包含有試劑是有毒的，吸入或接觸皮膚是有害的，如果吞咽可能是緻命的。不要用嘴吸。避免吸入 和接觸皮膚和眼睛。如果接觸，立即用大量的水沖洗并求助醫生。3.      在化學通風櫥下完成實驗。操作這些試劑時須穿戴合适的防護服，手套和眼睛和面部防護罩，完成實驗之後 把手徹底沖洗幹淨。 保存條件:  室溫，有效期 12 個月。         上海笃瑪生物科技有限公司